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IMDM的使用步骤

更新时间:2024-03-01      点击次数:278
  IMDM培养基在DMEM培养基的基础上添加了硒、HEPES、丙酮酸钠以及额外的氨基酸和维生素,并用硝酸钾代替了硝酸铁,营养非常丰富,非常适合于快速增殖,高密度细胞培养。IMDM培养基不仅可以培养有特殊营养要求的细胞,还可以作为一些特别的无血清培养基的基础液。IMDM培养基的使用方法:
  1、准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。
  2、校正pH值:将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。
  3、过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用IMDM(含双抗)纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。
  4、分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内,塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。
  5、灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到*底灭菌的目的。
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