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NEB PNGase F ( 无甘油 )

简要描述:概述

PNGase F 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的 N-连接糖,切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖,切割位点为:内侧的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式,便于在 HPLC 方法中取得*效果。

  • 产品型号:P0705L
  • 厂商性质:经销商
  • 更新时间:2024-05-16
  • 访  问  量:1433

详细介绍

品牌其他品牌货号P0705L
规格75,000 units供货周期现货
应用领域生物产业

概述

PNGase F 是一种酰胺酶,切割糖蛋白上的 N-连接糖,切割的糖型有:高甘露糖、杂合和复杂寡糖,切割位点为:内侧的 N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式,便于在 HPLC 方法中取得*效果。

来源

NEB #P0704 和 NEB #P0705 是从脑膜败血性黄杆菌(Flavobacterium meningosepticum)中提取纯化。


NEB #P0708 和 NEB #P0709 *自和平空间站伊丽莎菌(Elizabethkingia miricola,formerly Flavobacteriummeningosepticum)并在 E. coli 中高度表达。

反应条件

将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液(含 0.5% SDS,40mM DTT)中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性,再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中,37℃ 温育进行反应。热失活:75℃ 10 分钟。

随酶提供的试剂

10X 糖蛋白变性缓冲液

10X GlycoBuffer 2 缓冲液

10% NP-40

分子量

36,000 daltons。


质量保证

无糖苷外切酶污染,无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性,无蛋白水解活性。

单位定义

1 单位指 10 μl 的反应体系中,37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量(65 NEB units = 1 IUB milliunit)。

浓度

500,000 units/ml。


注意事项

已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制,所以在反应混合物中必须加入 NP-40。要使天然糖蛋白去糖基化,建议增加酶量并延长温育时间。


要使非变性糖蛋白去糖基化,建议增加酶量并延长温育时间。


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